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北京AU标记抗体方式

时间:2020-10-27 17:09:15  来源:http://bj.saiboerbio.com/product640408.html

最关键的AU标记抗体方式你清楚吗

1.琥铂酰酯 (NHS)

当应用荧光染料标记时,一般可选购内装有NHS琥铂酰酯(也称之为琥铂酰亚胺酯)的活化标记物。在适度标准下,活化的染剂可与抗体分子反映(抗体分子一般带有多了赖氨酸基团)而产生结合物。过多的活性染料可根据多种多样方式除掉(一般选用过柱层析),随后AU北京标记抗体可运用于免疫系统剖析。

2.异(基)双作用实验试剂 (Heterobifunctional reagents)

当AU北京标记抗体的标记物为蛋白质分子(如辣根乳酸脱氢酶HRP、碱性磷酸酶AP或藻红蛋白质PE)时,因为抗体和标记分子具备好几个胺,因而抗体标记步骤稍为繁杂。在这类状况下,一般必须对在其中一个分子(抗体)的一些赖氨酸开展装饰,为此造就一个新的反映基团(X),而AU标记抗体的标记物上的赖氨酸做为另一个反映基团(Y)。当抗体与标记物混和时,运用双作用实验试剂导入Y基团,随着与X基团产生反映,进而产生异二聚体结合物(即标记抗体)。有关双作用实验试剂标记抗体或别的微生物分子的运用,您能够在数百篇参考文献报导中寻找有关事例。

3.碳二亚胺(Carbodiimides)

这类实验试剂(EDC为普遍的事例)在胺基和含羧基的分子间产生共价联接。Carbodiimides活化羧基,活化的化工中间体接着被胺基(由抗体分子的赖氨酸出示)吸咐。Carbodiimides一般用以联接抗体和羧化的顆粒(如天然乳胶顆粒、磁珠),及其别的羧化的表层如微孔板或处理芯片表层。Carbodiimides非常少用以将染剂或蛋白质标记物偶联反应到AU标记抗体上。

4.高碘酸钠(Sodium periodate)

这类化合物针对绝大部分的标记物全是不适合的,但针对HRP标记却十分关键。高碘(Periodate)活化辣根乳酸脱氢酶分子的糖链,进而产生醛基,后面一种可与AU标记抗体分子上的赖氨酸反映。因为HRP分子自身带有很少的赖氨酸,因此相对性非常容易得到 抗体-HRP结合物,且无显著的HRP多聚化产生。

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