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北京培养基:细胞难伺候,你真的会选北京培养基吗?

时间:2021-8-21 3:00:00  来源:http://bj.saiboerbio.com/news669464.html

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培养基:细胞难伺候,你真的会选培养基吗?

  培养细胞的重要环节有很多,其中很重要的一步就是为细胞选择适合的生 长环境,为其选择成分适合又营养丰富的细胞培养基。细胞培养基是供给 细胞营养、维持细胞生长和增殖的多种营养物质的混合物,种类一般包括 经典/基础培养基、无血清培养基以及化学成分确定的培养基等。这其中又 以经典/基础培养基为常用。

  经典/基础培养基属于合成培养基,是根据天然培养基的成分,用化学物质 模拟合成、人工设计、配制的培养基,其主要成分有氨基酸、碳水化合物 、无机盐、维生素及其他辅助成分,比如 DMEM、RPMI 1640、MEM、 DMEM/F12,这些都是应用非常广泛的经典/基础细胞培养基。

  在确定培养基种类后,还会遇到培养基有不同分型的情况。那么对于经典 培养基中不同成分的作用及选择原则又是什么呢?

  1

  葡萄糖(Glucose)

  作用:细胞生长所需的主要能量来源。

  如何选择不同葡萄糖含量的培养基?

  当初的 DMEM 中,葡萄糖浓度为 1 g/L,现在称其为低糖型 DMEM,适合培 养多数哺乳动物细胞;

  高糖型 DMEM 中的葡萄糖浓度为 4.5 g/L,适合生长速度快,附着性较差 的肿瘤细胞;

  使用无糖培养基的主要目的是,通过控制细胞的能量来源,研究细胞的代 谢过程或葡萄糖利用效率。

  2

  HEPES

  作用:pH 缓冲剂。

  是一种氢离子缓冲剂,其作用不依赖于 CO2;

  在一定范围内对细胞无毒性作用,能较长时间控制恒定的 pH 范围,保证 细胞良好生长;

  部分细胞对酸碱度的变化非常敏感,建议使用 HEPES;

  根据需要,非必需。

  3

  L-谷氨酰胺(L-glutamine)

  作用:L-谷氨酰胺是一种氨基酸,细胞的重要能量来源,参与蛋白质的合 成,也为合成核酸提供碳源。

  存在的不足:

  L-谷氨酰胺不稳定,在中性的水溶液中会自发降解;

  降解产物氨对细胞有毒性;

  对氨敏感的细胞(如干细胞和原代细胞等)或培养环境(高密度反应器, 无补料的长期培养)不推荐含 L-谷氨酰胺的培养基。

  解决方案:

  选择不含谷氨酰胺的培养基,在使用前再添加 L-谷氨酰胺,并尽快用完;

  选择稳定的谷氨酰胺替代物,如 glutaGRO?。

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