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北京佐剂小编告诉您细菌培养基是如何去灭菌的

时间:2020-5-17 3:00:00  来源:http://bj.saiboerbio.com/news376103.html

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您晓得细菌培育基是怎样灭菌的吗?下面跟着佐剂小编一同来看看这篇文章吧!

佐剂小编理解到培育基的灭菌办法主要有两种,高压除菌及过滤除菌。细菌培育基与过滤相比,高压灭菌的工作强度小,本钱较低,但易形成营养成分的流失,而且在屡次加样(无菌谷氨酰胺溶液,无菌碳酸氢钠溶液等)过程中容易形成二次污染。

大多数培育基采用0.1~0.2μm孔径的微孔滤膜停止过滤灭菌,并且已成为培育基除菌的开展方向,它可低限度地减少培育基的营养损失。

 1、高压灭菌

某些培育基(如MEM)可停止高压灭菌,这类培育基普通不含有L-谷氨酰胺和碳酸氢钠,普通是在培育基高压灭菌后参加L-谷氨酰胺和碳酸氢钠的无菌的液体。另外可用耐高压的谷氨酸盐(如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺)替代L-谷氨酰胺。佐剂小编通知您可高压灭菌的培育基在121℃、15psi,15分钟的条件下完整可到达灭菌效果及营养成分的较小损失,不需将灭菌时间延长。为保证高压灭菌的效果,灭菌设备的考证很关键。

2、过滤除菌

目前培育工作中采用的培育用液包括人工合成培育液、消化用酶等,常含有维生素、蛋白质、多肽、生长因子等物质,这些物质在高温或射线映照下易发作变性或失去功用,因此上述液体多采用过滤消毒以除去细菌。可供过滤灭菌运用的滤膜很多,其资料多为polyethersulphone(PES)、尼龙、多聚碳酸盐、醋酸纤维素、硝酸纤维素、PTFE、陶瓷等。目前常用的滤器有Zeiss滤器、玻璃漏斗式滤器和针式微孔滤器。

 其中,Zeiss滤器为不锈钢的金属构造,滤板具有一定的厚度,可接受一定的压力,因而是过滤稀薄液体较理想的滤器。佐剂小编通知您滤板有不同的规格,EKS2,EKS3等。国产的有甲1、甲2、甲3等,但因孔径很小,过滤速度较慢。Zeiss滤器可分为抽滤式或加压式抽滤式滤器与抽滤瓶相连,真空泵抽气构成负压以过滤液体,其效率不如加压式。由于抽气形成负压抽吸,操作运用时要避免倒流而惹起污染,因而要留意防止将出、入管道接错;中止抽气时应运用气体迟缓回流,要先用止血钳夹住抽气管再关机,避免气体回流。参加待过滤的液体后,通以气体(常用N2、O2),构成压力将液体滤过,效果较佳。运用时留意压力不能过大,不应超越0.2kg/cm2。

另外,由于运用的滤板为石棉,因而细菌培育基在过滤前应先以少量生理盐水潮湿滤板。Zeiss滤器的清洗比玻璃滤器简单,滤板属一次性,运用后即可弃去,以自来水将金属滤器初步冲洗,用洗濯剂刷洗洁净,自来水冲净,蒸馏水漂洗2-3次,晾干包装。佐剂小编提示您消毒前将滤板装好,旋钮不要拧得太紧。此外,也可在石棉滤板上加一层滤膜,以增加过滤效果。

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